超微量核酸分析儀通常基于紫外-可見分光光度法的原理。核酸分子在特定波長下(如260nm對于DNA和280nm對于RNA)具有特征性的吸光度。儀器通過一束特定波長的光照射樣品,然后測量透過光的強度。根據朗伯-比爾定律,吸光度與樣品中核酸的濃度成正比。
為了實現超微量的檢測,儀器采用了先進的光學系統和高靈敏度的探測器。常見的光學系統包括氙燈或氘燈作為光源,以及高精度的單色器來選擇特定波長的光。探測器通常為光電二極管陣列或電荷耦合器件(CCD),能夠快速、準確地檢測微弱的光信號。一些還結合了熒光檢測技術。通過使用特定的熒光染料與核酸結合,在激發光的作用下產生熒光信號,從而提高檢測的靈敏度和特異性。
1.超高靈敏度
能夠檢測極微量的核酸樣品,通常只需0.5-2μL的樣品體積,這對于珍貴或難以獲取的樣品尤為重要。
2.寬濃度范圍檢測
可以同時準確測量從納克級到微克級的核酸濃度,適應不同濃度樣品的檢測需求。
3.快速檢測
在短短幾秒鐘內即可完成樣品的檢測和分析,大大提高了實驗效率。
4.無需稀釋
直接對原始樣品進行檢測,避免了因稀釋可能帶來的誤差和樣品損失。
5.多參數分析
除了測量核酸濃度,還能同時提供如A260/A280比值、A260/A230比值等參數,用于評估核酸的純度。
6.操作簡便
儀器通常配備了直觀的用戶界面和自動化的操作流程,使操作人員能夠輕松上手。
應用領域:
1.分子生物學研究
在基因克隆、PCR擴增、DNA測序等實驗中,準確測定核酸樣品的濃度和純度是實驗成功的關鍵。能夠為研究人員提供快速、準確的核酸定量數據。
2.疾病診斷
例如在腫瘤診斷中,通過檢測患者血液或組織中的特定核酸標志物,如微小RNA(miRNA),為疾病的早期診斷和預后評估提供依據。
3.藥物研發
在新藥開發過程中,對核酸藥物的質量控制和活性評估離不開對核酸的精確分析。
4.農業和畜牧業
用于檢測動植物的基因變異、遺傳育種以及病原體的核酸檢測。
5.環境監測
檢測環境中的微生物和污染物的核酸,評估環境質量和生態系統的健康狀況。
使用超微量核酸分析儀的注意事項:
1.樣品制備
確保樣品的純度和均一性,避免雜質對檢測結果的干擾。
2.儀器校準
定期對儀器進行校準,以保證檢測結果的準確性和可靠性。
3.操作規范
嚴格按照儀器的操作手冊進行操作,避免因操作不當導致的誤差和儀器損壞。
4.維護保養
定期對儀器進行清潔、維護和檢查,確保儀器的正常運行和使用壽命。